上海分光光度計的基本構成是用一個分光器件（棱鏡、鏡子）把一個光源的光分成兩路（確保兩個光的波長一致）分別照射在相同的透光容器中的樣品（被測）和基準（標準，已知濃度、成分）溶液，然后對比穿過后的光線（對比樣品和基準的顏色），即可對樣品和基準的一致性做出定性判斷（如：是否達標）。通過樣品與多個基準的對比可以對樣品做出定量分析。
選擇可見和紫外可見的分光光度計所關注的關鍵的指標有三點：一是波長范圍，二是波長準確度，三是雜散光參數。波長范圍的選擇是由用戶實驗需要所定，波長范圍越寬的價格越貴;波長準確度及雜散光參數的數值越低，表示性能越好。
使用上海分光光度計的步驟與方法：
（1）預熱儀器：
為使測定穩定，將電源開關打開，使儀器預熱20min，為了防止光電管疲勞，不要連續光照。預熱儀器時和在不測定時應將比色皿暗箱蓋打開，使光路切斷。
（2）選定波長：
根據實驗要求，轉動波長調節器，使指針指示所需要的單色光波長。
（3）固定靈敏度檔：
根據有色溶液對光的吸收情況，為使吸光度讀數為0.2～0.7，選擇合適的靈敏度。為此，旋動靈敏度檔，使其固定于某一檔，在實驗過程中不再變動。一般測量固定在“1”檔。
（4）調節“0”點：
輕輕旋動調“0”電位器，使讀數表頭指針恰好位于透光度為“0”處（此時，比色皿暗箱蓋是打開的，光路被切斷，光電管不受光照）。
（5）調節T=100%：
將盛蒸餾水(或空白溶液或純溶劑)的比色皿放入比色皿座架中的第一格內，有色溶液放在其它格內，把比色皿暗箱蓋子輕輕蓋上，轉動光量調節器，使透光度T=100%，即，表頭指針恰好指在T=100%處。
（6）測定：
輕輕拉動比色皿座架拉桿，使有色溶液進入光路，此時表頭指針所示為該有色溶液的吸光度A，讀數后，打開比色皿暗箱蓋。
（7）關機：
實驗完畢，切斷電源，將比色皿取出洗凈，并將比色皿座架及暗箱用軟紙擦凈。
